آﻧ ﺘﺎ ﺧﻨﺎﻓﺮ ( ي ﻋﻀﻮ ﻫﯿﺌﺖ ﻋﻠﻤﯽ داﻧﺸﮕﺎه آزاد اﺳﻼﻣﯽ، واﺣﺪ ﻋﻠﻮم و ﺗﺤﻘﯿﻘﺎت و واﺣﺪ ﺗﻬﺮان ﺷﻤﺎل )رواﻧﺒﺨﺶ ﺷﯿﺮدم( ﻋﻀﻮ ﻫﯿﺌﺖ ﻋﻠﻤﯽ آﻣﻮزﺷﮑﺪه ﻣﺤﯿﻂ زﯾﺴﺖ )اﻋ ﻈﻢ ﻃﺒﺎﻃﺒﺎﯾﯽ ( ﮐﺎرﺷﻨﺎس دﻓﺘﺮ اﻣﻮر آزﻣﺎﯾﺸﮕﺎﻫﻬﺎ، ﺳﺎزﻣﺎن ﻣﺤﯿﻂ زﯾﺴﺖ ﺗﻬﺮان ) ﭼﮑﯿﺪه  ، ﮐـﺎرﺑﺮد 1 اﻣﺮوزه ﭘﺎﮐﺴﺎزي زﯾﺴﺘﯽ ﯾآﻻ ﻨﺪه ﻫﺎ ي ﻣﺤﯿﻄ ،ﯽ ﺑﺮ ﭘﺎﯾﻪ ﺑﻪ ﮐﺎرﮔ ﺮﯿ ﯿﻣ ي ﮑﺮوارﮔﺎﻧﯿﺴـ ﻤﻬﺎ ﺑـﻪ روش ﺑﺎﯾﻮرﻣﺪﯾﺸـﻦ وﺳ ﯿﭘ ﯽﻌﯿ ﺪا ﮐﺮده اﺳﺖ . ﺑﺎ ﺗﻮﺟﻪ ﺑﻪ ﺗﻨﻮع ﻣﺘﺎﺑﻮﻟ ﮑﯿ ﯿﻣ ﯽ ﮑﺮوارﮔﺎﻧﯿﺴﻤﻬﺎ و ﺗﻮان اﺳﺘﻔﺎده آﻧﻬﺎ از آﻻﯾﻨـﺪه ﻫـﺎ ي ﻣﺤﯿﻄـ ﯽ ﺑـﻪ ﻋﻨﻮان ﻣﻨﺎﺑﻊ ﻏﺬاﯾﯽ و ﺗﻮاﻧﺎﯾﯽ ﺗﺒﺪﯾﻞ آﻧﻬﺎ ﺑﻪ ﻓﺮﻣﯽ ﺑﺎ ﭘﺎﯾﺪاري ﺑﯿﺸﺘﺮ و ﺳﻤﯿﺖ ﮐﻤﺘﺮ ﯾ ﺑﺎ ، ﮏ اﻧﺘﺨﺎب ﻣﻨﺎﺳﺐ ﻣـ ﯽ ﺗـﻮان از آﻧﻬﺎ در ﺗﺠﺰ ،ﻪﯾ ﺟﺬب و ﺣﺬف ﯾآﻻ ﻨﺪه ﻫﺎ ي ﻣﺨﺘﻠﻒ ﺳﻮد ﺑﺮ .ددر اﯾﻦ ﺗﺤﻘﯿﻖ ﺑﻪ ﻣﻨﻈﻮر ﺟﺪا ﺳﺎز ي ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﻬﺎ ي درﯾﺎز ي ﮐﺎﻫﺶ دﻫﻨﺪه ﻓﻠﺰات ﺳﻨﮕﯿﻦ ﻫﻤﭽﻮن واﻧﺎدﯾﻮم ، ﮐﺎدﻣﯿﻮم و ﻧﯿﮑﻞ،  ﺣﺎو ي 20-100ppm ﻓﻠﺰات ﻓـﻮق، 2 از رﺳﻮﺑﺎت ﻗﺴﻤﺖ ﺷﺮﻗﯽ ﺗﺎﻻب اﻧﺰﻟﯽ ( درﯾﺎي ﺧﺰر) ﺑﺮ رو ي ﻣﺤﯿﻂ ﮐﺸﺖ BHIﮐﺸﺖ ﻻزم ﺗﻬﯿﻪ ﺷﺪ. ﭘﺲ از ﮐﺸﺖ و ﮔﺮﻣﺎﮔﺬار ي در دﻣﺎ ي30C ، ﮐﻠﻨ ﻫﺎ ﯽ ي ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﻬﺎ ي ﻣﻘﺎوم ﺑﻪ ﻓﻠﺰات ﻓﻮق ﺟﺪاﺳﺎز يﮔﺮدﯾﺪ و ﺑﻌﺪ از ﺗﻌﯿﯿﻦ MIC وMBC ، ﻣﻘﺎوﻣﺘﺮﯾﻦ ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﻬﺎ ﺑﻪ ﻓﻠﺰات ﺳﻨﮕﯿﻦ ﺷﻨﺎﺳـﺎﯾ ﯽ ﺷـﺪﻧﺪ . ﺳـﭙﺲ ﺟـﺬب ﻓﻠـﺰات ﺳﻨﮕﯿﻦ ﺑﻮﺳﯿﻠﻪ آﻧﺎﻟﯿﺰ دﺳﺘﮕﺎﻫﯽ در ﺑﯿﻮﻣﺲ و ﻣﺤﻠﻮل روﯾﯽ اﻧﺪازه ﮔﯿﺮي ﮔﺮدﯾﺪ. ﻧﺘﺎﯾﺞ ﺣﺎﺻـﻞ از اﯾـﻦ ﺗﺤﻘﯿـﻖ اﻓـﺰاﯾﺶ ﺟﺬب ﻓﻠﺰات و رﺷﺪ ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﻬﺎ ي ﻓﻮق را در ﺣﻀﻮر ﮐـﺎدﻣﯿﻮم و ﻧﯿﮑـﻞ ﺑـﺎ ﻏﻠﻈﺘﻬـﺎي 80-100 ppm و واﻧـﺎدﯾﻮم را در ﻏﻠﻈﺖ 40 ppm ﻧﺸﺎن داد. ﺑﺎﻻﺗﺮﯾﻦ ﻣﯿﺰان ﺟﺬب ﻓﻠﺰات ﺳﻨﮕﯿﻦ در دﻣﺎي 30C و ﻣـﺪت زﻣـﺎن 72 h ﮔﺮﻣـﺎ ﮔـﺬاري ﻣﺸﺎﻫﺪه ﮔﺮدﯾﺪ. ﻧﺘﺎﯾﺞ ﺣﺎﺻﻞ ﺑﯿﺎﻧﮕﺮ ﺗﺠﻤﻊ زﯾﺴﺘ ﯽ 40-50 % ﮐﺎدﻣﯿﻢ 6 - 5 ، % ﻧﯿﮑﻞ و 10-12% واﻧﺎدﯾﻮم ﺑﻮﺳﯿﻠﻪ اﯾـﻦ ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾﻬ ي آزاد ﺑﻮد .درﻣﺮﺣﻠﻪ ﺑﻌﺪ ﺑﮑﺎرﮔﯿﺮ ي ﺳﻠﻮﻟﻬﺎي ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﺎﯾﯽ ﻣﺤﺒﻮس ﺷﺪه در ژل ﺳﺪﯾﻢ آﻟﮋﯾﻨﺎت، ﺿﺮﯾﺐ ﺟﺬب 50 -100 % را ﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ ﺳﻠﻮل ﻫﺎي آزاد ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﺎﯾﯽ ﻧﺸﺎن دادﻧﺪ . ﺳﭙﺲ داﻧﻪ ﻫﺎ ي آﻟﮋﯾﻨﺎت ﺣﺎو ي ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﻬﺎ ي ﻓﻮق ﭘﺲ از ﺗﺜﺒﯿﺖ در ﮔﻠﻮﺗﺎرآﻟﺪﺋﯿﺪ 2% ﺑﺮا ي ﻣﺸﺎﻫﺪه ﺑﺎ ﻣﯿﮑﺮوﺳﮑﻮپ اﻟﮑﺘﺮوﻧ ﯽ آﻣﺎده ﺳﺎزي ﺷﺪﻧﺪ .ﻧﺘﺎﯾﺞ آﻧﺎﻟﯿﺰ ﻣﯿﮑﺮوﺳﮑﻮپ اﻟﮑﺘﺮوﻧﯽ در اﯾﻦ ﺗﺤﻘﯿﻖ ﻧﺸﺎن داد ﮐﻪ ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﻬﺎي درﯾﺎﯾﯽ ﻗﺎدر ﺑﻪ ﺗﺠﻤﻊ ﻫﻤﺰﻣـﺎن ﭼﻨـﺪﯾﻦ ﻓﻠـﺰ ﻣﯽ ﺑﺎﺷﻨﺪ. ﻫﻤﭽﻨﯿﻦ ﺗﺠﻤﻊ ﮐﺎدﻣﯿﻮم و واﻧﺎدﯾ مﻮ دراﯾﻦ ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﻬﺎ ﺑﯿﺶ از ﻧﯿﮑﻞ ﻣﻼﺣﻈﻪ ﺷﺪ . واژه ﻫﺎي ﮐﻠﯿﺪي: ﭘﺎﮐﺴﺎزي زﯾﺴﺘﯽ، ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﻬﺎي درﯾﺎﯾﯽ، ﮐﺎدﻣﯿﻮم، واﻧﺎدﯾﻢ، ﻧﯿﮑﻞ    1 Bioremediation2 Brain Heart Infusion AgarÏﻣﻘﺪﻣﻪ  در دﻫﻪ ﮔﺬﺷﺘﻪ ورود آﻻﯾﻨﺪه ﻫﺎ ي ﻓﻠﺰ ي ﺑﺎ ﻣﻨﺸﺎ اﻧﺴﺎﻧ ﺑﻪ ﯽ ﻣﺤ ﻫﺎ ﻂﯿ ﺎﯾدر ي ﯾﯽ، ﺑﻪ ﻣﻘﺪار زﺎدﯾ ي اﻓﺰاﯾﺶ ﯾﺎﻓﺘﻪ اﺳﺖ، ﮐـﻪ ﺧﻄﺮ ي ﺟﺪ ﺑﺮا ي ﯿﺣ ي ﺎت ﻣﺤﯿﻂ ﻫﺎ آﺑ ي ﯽ ﺑﺸﻤﺎر ﻨﺪﯾآ ﯽﻣ (Hussein et al., 2005). ﯿﻣ ﺰان ورود ﻦﯾا ﻓﻠﺰات ﺑﻪ ﻣﺤﯿﻂ ﯾز ﺴﺖ، ﻣﺘﺠﺎوز از ﻣ ﺰاﻧﯿ ﯽ اﺳﺖ ﮐﻪ ﺑﻮﺳﯿﻠﻪ ﻓﺮاﯾﻨﺪﻫﺎ ﯽﻌﯿﻃﺒ ي ﺑﺮداﺷﺖ ﯽﻣ ﺷﻮﻧﺪ. ﺑﻨﺎﺑ ﯾﺮا ﻦ ﺗﺠﻤﻊ ﻓﻠﺰات ﺳﻨﮕﯿﻦ در ﻣﺤﯿﻂ ﯾزﺴﺖ ﻣﻮرد ﺗﻮﺟﻪ ﻣ ﯽ ﺑﺎﺷﺪ (Matagi et al., 1998) .از ﻧﻘﻄﻪ ﻧﻈﺮ اﮐﻮﻟﻮژﯾﮑﯽ، آﻻﯾﻨﺪه ﻫﺎ ﺑﻪ دو ﻧﻮع آﻻﯾﻨﺪه ﻫﺎي ﻗﺎﺑﻞ ﺗﺠﺰﯾﻪ و ﻏﯿﺮﻗﺎﺑﻞ ﺗﺠﺰﯾﻪ ﺗﻘﺴﯿﻢ ﻣﯽ ﺷﻮﻧﺪ. آﻻﯾﻨﺪه ﻫـﺎي ﻏﯿﺮ ﻗﺎﺑﻞ ﺗﺠﺰﯾﻪ ﻧﻈﯿﺮ ﺗﺮﮐﯿﺒﺎت و ﻧﻤﮏ ﻫﺎي ﻓﻠﺰات ﺳﻨﮕﯿﻦ، ﺗﺮﮐﯿﺒﺎت ﺷﯿﻤﯿﺎﯾﯽ ﻓﻨﻠﯽ ﺑﺎ زﻧﺠﯿﺮه ﻃﻮﻻﻧﯽ، آﻓﺖ ﮐﺸـﻬﺎ ﻣﺜـﻞ DDT ﻣﯽ ﺑﺎﺷﻨﺪ ﮐﻪ در ﻣﺤﯿﻂ، ﺗﺠﻤﻊ ﻣﯽ ﯾﺎﺑﻨﺪ و ﺑﺮ روي زﻧﺠﯿﺮه ﻏﺬاﯾﯽ وﺑﯿﻮﻟﻮژﯾﮑﯽ ﻣﻮﺟﻮدات در آب اﺛﺮ ﻣﯽ ﮔﺬارﻧﺪ. ازدﯾﺎد ﻏﻠﻈﺖ اﯾﻦ ﻣﻮاد روي ﻣﺎﻫﯽ ﻫﺎ، ﺳﺎﯾﺮ ﻣﻮﺟﻮدات آﺑﺰي و ﺣﺘﯽ ﮔﯿﺎﻫﺎن آﺑﺰي اﺛﺮات ﺳﻮء دارد. آﻧﻬـﺎ در ﺗﺮﮐﯿـﺐ ﺑـﺎ ﻣﻮاد دﯾﮕﺮ ﺑﺎﻋﺚ ﺗﻮﻟﯿﺪ ﺗﻮﮐﺴﯿﻦ ﻫﺎي اﺿﺎﻓﯽ ﻣﯽ ﺷﻮﻧﺪ. ﺑﺮاي ﻣﺜﺎل ﺗﺮﮐﯿﺐ ﻓﻠﺰات ﺳﻨﮕﯿﻦ ﻧﻈﯿﺮ ﻣﺲ ﺑﺎ ﮐﺎدﻣﯿﻮم و روي ﺑﺎ ﻧﯿﮑﻞ، ﺳﻤﯿﺖ آﻧﻬﺎ را ﭼﻨﺪﯾﻦ ﺑﺮاﺑﺮ ﻣﯽ ﮐﻨﻨﺪ. ﺗﺠﻤﻊ ﻓﻠﺰات ﺳﻨﮕﯿﻦ در آب، ﻫﻮا و ﺧﺎك، ﯾﮏ ﻣﺸﮑﻞ زﯾﺴﺖ ﻣﺤﯿﻄﯽ ﻣﻬـﻢ ﻣﯽ ﺑﺎﺷﺪ. در ﺳﺎﻟﻬﺎي اﺧﯿﺮ ﭼﻨﺪﯾﻦ ﺗﮑﻨﻮﻟﻮژي ﺑﺎ ﻫﺪف ﮐﺎﻫﺶ ﯾﺎ ﺑﺮداﺷﺖ ﻓﻠﺰات ﺳﻨﮕﯿﻦ ﻣﻮﺟﻮد در ﻣﺤﯿﻂ آﻟﻮده، ﺗﻮﺳﻌﻪ ﯾﺎﻓﺘﻪ اﺳﺖ. در اﯾﻦ ﻣﯿﺎن ﺗﮑﻨﻮﻟﻮژي ﻫﺎﯾﯽ ﮐﻪ ﺑﺮاﺳﺎس اﺳﺘﻔﺎده از ﻣﯿﮑﺮوارﮔﺎﻧﯿﺴﻢ ﻫﺎ، ﭘﺎﯾﻪ رﯾﺰي ﺷﺪه اﺳﺖ ﻣﻮرد ﺗﻮﺟـﻪ . (Hussein et al., 2005 ) اﻧﺪ ﮔﺮﻓﺘﻪ ﻗﺮارﻫﺮ ﭼﻨﺪ ﺗﮑﻨﻮﻟﻮژ ﻫﺎ ي ي ﻣﺮﺳﻮم ﻓ ﯾﺰﯿ ﮑﻮﺷ ﺎﯿﻤﯿ ﯾﯽ، ﻣﺜﻞ ﺗﻪ ﻧﺸـ ﯽﻨﯿ ﯿﻓ، ﻠﺘﺮاﺳـ ﯿﻮن، اﺳـﻤﺰ ﻣﻌﮑـﻮس، اﮐﺴ ﯿﺪاﺳـ ﯿﻮن اﺣ - ﯿـ ﺎ و ﺟﺪاﺳﺎز ي ﺗﻮﺳﻂ ﻏﺸﺎ، ﺑﺮا ي ﺑﺮداﺷﺖ آﻟﻮدﮔ ﻫﺎ ﯽ ي ﻋﻤﺪه ﻓﻠﺰ ي از ﭘﺴﺎب ﻫﺎ ي ﺻﻨﻌﺘ ﻣﻨ ﯽ ﺎﺳـﺐ ﺑـﻮده ، اﻣـﺎ ﺑـﺪﻟ ﯿﻞ ﻋـﺪم ﮐــــﺎﻫﺶ ﻏﻠﻈــــﺖ ﻫــــﺎ ي ﻓﻠــــﺰات ﺳــــﻨﮕ ﯿﻦ، ﺑــــﻪ ﺣــــﺪ اﺳــــﺘﺎﻧﺪاردﻫﺎ ي ﻗــــﺎﻧﻮﻧ ﯽ ﻣــــﻮرد ﻗﺒــــﻮل،  (Zhaohui et al., 2002 ،)ﻫﺰﯾﻨﻪ ز ،ﺎدﯾ ﺗﺸﮑﯿﻞ ﻣﻮاد ﺣﺪ واﺳﻂ ﺳﻤ ﯽ (Paul et al., 2005 ،) ﻋـﺪم اﺳـﺘﻔﺎده داﺋﻤـ و ﯽﻃﻮﻻﻧ ﯽ ﻣﺪت، ﻣﺸﮑﻼت در ﺟ ﻤﻊ آور ي ﭘﺴﺎب ﻫﺎ ي ﺟﺎﻣﺪ ﺗﻮﻟﯿﺪ ﺷﺪه ﯾاو ﺠﺎد اﺗﺼﺎﻻت ﻓﻠﺰ ﯿﻏ ي ﺮ اﺧﺘﺼﺎﺻ ﯽ ﻧﺎﻣﻨﺎﺳـﺐ . (Hussein et al., 2005) ﺑﺎﺷﻨﺪ ﯽﻣ در ﺳﺎﻟﻬﺎ ﯿاﺧ ي ﺮ دﺳﺘﺎوردﻫﺎ ﯿﺑ ي ﻮﺗﮑﻨﻮﻟﻮژ ي ﺑﻪ ﻋﻨﻮان ﯾﮏ اﺑﺰار ﻣﺘﻔﺎوت، ﺑﻪ ﻣﻘﺪار زﺎدﯾ ي ﻣﻮرد ﺗﻮﺟﻪ ﻗﺮارﮔﺮﻓﺘﻪ اﺳﺖ ﮐﻪ د ﯾر اﻦ ﺑﯿﻦ، اﺳﺘﻔﺎده از ﻣﯿﮑﺮوارﮔﺎﻧﯿﺴﻢ ﻫﺎ ﺑﺮا ي ﯾﺑﺎزﺎب ﻓﻠﺰات از ﭘﺴﺎب ﻫﺎ ﺗﻮﺟﻪ زﺎدﯾ ي را ﺑﻪ ﺧﻮد اﺧﺘﺼﺎص داده اﺳﺖ  (. Cabrera et al., 2005)و 3 Ni ، 4 Cd ﻫﺪف از اﯾﻦ ﺗﺤﻘﯿﻖ ﺷﻨﺎﺳﺎﯾﯽ و ﺟﺪاﺳﺎزي ﺑﺎﮐﺘﺮي ﻫﺎي درﯾﺎﯾﯽ ﻣﻘﺎوم ﺑﻪ ﻓﻠﺰاﺗﯽ ﻣﺎﻧﻨﺪ V ﺟﻬﺖ اﺳﺘﻔﺎده از 5آﻧﻬﺎ در ﺑﺮداﺷﺖ اﯾﻦ ﻓﻠﺰات از ﭘﺴﺎب ﻫﺎي آﻟﻮده ﻣﯽ ﺑﺎﺷﺪ .ﻣﻮاد و روش ﻫﺎ  - ﻧﻤﻮﻧﻪ ﺑﺮداري ﺑﻪ ﻣﻨﻈﻮر ﺟﺪاﺳﺎز ي ﻧﻤﻮﻧﻪ ﻫﺎ ﯿﻣ ي ﮑﺮوﺑ ﻣﻘ ﯽ ﺎوم ﺑﻪ ﺳﻪ ﻓﻠﺰ ﺳﻨﮕﯿﻦ ﮐﺎدﻣﯿﻮم، واﻧﺎدﯾﻮم و ﻧﯿﮑﻞ، ﻧﻤﻮﻧﻪ ﺑﺮدار ي ﺑﺎ اﺳﺘﻔﺎده از ﻧﻤﻮﻧﻪ ﺑﺮدار ون ﻦﯾو ﮔﺮاپ Van Win Grap از رﺳﻮﺑﺎت ﻋﻤﻘ ﯽ ﻣﺪﺧﻞ ورود ي رودﺧﺎﻧﻪ ﭘﯿﺮﺑﺎزار و ﺻﺪﻣﺘﺮ ي ﻣﺪﺧﻞ ورود ﯾا ي ﻦ رودﺧﺎﻧﻪ در ﻗﺴﻤﺖ ﺷﺮﻗ ﯽ ﺗﺎﻻب اﻧﺰﻟ ﯽ ﺻﻮرت ﮔﺮﻓﺖ . 3 Vanadium 4 Nickel 5 Cadmium Р- ﮐﺸﺖ ﻣﯿﮑﺮوﺑ ﯽ و ﺗﺨﻠﯿﺺ ﺑﺎﮐﺘﺮ ﻫﺎ ي ي ﻣﻘﺎوم ﺑﻪ ﺳﻪ ﻓﻠﺰ Ni ، V و Cd ( ﺟﺪاﺳﺎز ي )ﻪﯿاوﻟ از ﻧﻤﻮﻧﻪ ﻫﺎ ي آب و رﺳﻮب، رو ي ﻣﺤ ﻂﯿ ﻫﺎي ﮐﺸﺖ Brain Heart Infusion Agar ﺣـﺎو 1/0 ي ﻣـﻮﻻر ﮐـﺎدﻣ ﯿﻮم . ﺷـﺪ ﻪﯿﺗﻬ ﮐﺸﺖ ( VCl3 )واﻧﺎدﯾﻮم ﻣﻮﻻر ،1/0 (Ni (NO3)2 .6H2O) ﮑﻞ ﯿﻧ ﻣﻮﻻر (، 1/0 Cd (NO3)2. 4H2O)ﻧﻤﻮﻧﻪ ﻫﺎ ﺑﻪ ﻣﺪت 72 ﺳﺎﻋﺖ در دﻣﺎ ي 30c ﮔﺮﻣﺎﮔﺬار ي ﺷﺪﻧﺪ . ﺳـﭙﺲ ﮐﻠﻨـ ﯽ ﻫـﺎ ي ﻣﻮﺟـﻮد در ﺳـﻄﺢ ﻣﺤـ ﯿﻂ ﮐﺸـﺖ .( Lyer et al., 2004; Malekzadeh et al., 2002; Hussein et al., 2004) ﺷﺪﻧﺪ ﺗﺨﻠﯿﺺ و ي ﺟﺪاﺳﺎز - اﻧﺘﺨﺎب ﺳﻮﯾﻪ ﻫﺎ ﻨﻪﯿﺑﻬ ي ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾ ﯾﯽ ﻣﻘﺎوم ﺑﻪ ﺳﻪ ﻓﻠﺰ ﮐﺎدﻣﯿﻮم، ﻧﯿﮑﻞ و واﻧﺎدﯾﻮم  (ﺣﺪاﻗﻞ ﻏﻠﻈﺖ ﻓﻠﺰي ﮐﻪ از رﺷﺪ ﺑﺎﮐﺘﺮي ﻫﺎ ﺟﻠﻮﮔﯿﺮي ﻣﯽ ﮐﻨـﺪ ) 6 ﺳﻮﯾﻪ ﻫﺎي ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﺎﯾﯽ ﻣﻘﺎوم ﺑﻪ ﻓﻠﺰات ﺑﻪ روش MICوMBC (ﺣــــﺪاﻗﻞ ﻏﻠﻈــــﺖ ﻓﻠــــﺰي ﮐــــﻪ اﺛــــﺮ ﮐﺸــــﻨﺪﮔﯽ روي ﺑــــﺎﮐﺘﺮي ﻫــــﺎ دارد) ﺷﻨﺎﺳــــﺎﯾﯽ ﺷــــﺪﻧﺪ 7 (Piotrowska - Seget et al., 2005) . ﺟﻬﺖ ﺗﻌﯿﯿﻦ ﻣﻘﺎوﻣﺖ ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾ ﯾﯽ در ﺑﺮاﺑﺮ ﻏﻠﻈـﺖ ﻫـﺎ ي ﻣﺨﺘﻠـﻒ ﻓﻠـﺰات ،  ﺣﺎو ي ﻏﻠﻈـﺖ ﻫـﺎ ي ﻣﺨﺘﻠـﻒ ﻓﻠـﺰات Ni ، V و 8 ppm ) Cd ﻣﺤ ﻂﯿ ﻫﺎي ﮐﺸﺖ Brain Heart Infusion Broth5 100- ) ﯿﺗﻬﻪ ﮔﺮد . ﺪﯾ ﺳﭙﺲ ﺳﻮﺳﭙﺎﻧﺴﯿﻮن ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾ ﯾﯽ ﯿﺗﻬ ﻪ ﺷﺪه از ﺑﺎﮐﺘﺮ ﻫﺎ ي ي ﻣﻘﺎوم ﺑﻪ ﻓﻠـﺰات ﺑـﻪ ﻋﻨـﻮان ﻣـﺎده ﺗﻠﻘـﯿﺢ  3) ، ﺑﻪ ﻣﺤﯿﻂ ﮐﺸﺖ ﻓﻮق ﺗﻠﻘﯿﺢ ﮔﺮدﯾـ ﺪ و ﺑـﻪ ﻫ ﻤـﺮاه ﯾـ ﮏ ﺷـﺎﻫﺪ (BHI broth ﺑـﺪون ﻓﻠـﺰ + 8 (ﺗﻘﺮﯾﺒﺎ 10 cfu/mlﺑﺎﮐﺘﺮ )ي ﺑﻪ ﻣﺪت 72 ﺳﺎﻋﺖ در دﻣﺎ ي 30c ﮔﺮﻣﺎﮔﺬار ي ﺷﺪﻧﺪ (Lyer et al., 2004 ). ﺳـﭙﺲ ﻣﯿـ ﺰان MIC و MBC ﺑﺮا ي ﻫﺮ ﺑﺎﮐﺘﺮ ي ﻣﺸﺨﺺ ﮔﺮد .ﺪﯾ - رﺳﻢ ﻣﻨﺤﻨ ﯽ رﺷﺪ ﺑﺎﮐﺘﺮ ﻬﺎﯾ ي ﻣﻘﺎوم ﺑﻪ ﻓﻠﺰات و ﺗﻌﯿﯿﻦ ﻣﯿﺰان ﺟﺬب ﻓﻠﺰات ﺗﻮﺳﻂ آﻧﻬﺎ رﺳﻢ ﻣﻨﺤﻨ ﯽ رﺷﺪ : ﺑﺎ ﺗﻮﺟﻪ ﺑﻪ ﻣﻘﺎوﻣﺖ ﺑﺎﮐﺘﺮ ﻫﺎ ي ي ﺗﺨﻠﯿﺺ ﺷﺪه در ﺑﺮاﺑﺮ ﻏﻠﻈﺖ ﻫﺎ ي ﻣﺨﺘﻠﻒ ﻓﻠﺰي، ﺳﻮﯾﻪ ﻫـﺎ ﯾﯽ ﮐـﻪ در ﻏﻠﻈﺖ ﻫﺎ ي ﺑﺎﻻﺗﺮ از 40 ppm رﺷﺪ داﺷﺘﻨﺪ، ﺟﻬﺖ رﺳﻢ ﻣﻨﺤﻨ ﯽ رﺷﺪ و ﺗﻌﯿﯿﻦ ﻣﯿﺰان ﺟﺬب ﻓﻠﺰات اﻧﺘﺨـﺎب ﺷـﺪﻧﺪ . ﯾﺑﺪﻦ ﻣﻨﻈﻮر ﺑﺎﮐﺘﺮ ي ﻫﺎ ﺑﻪ ﻣﺤﯿﻂ ﻫﺎ ي ﮐﺸﺖ ﺑﺎ ﯿﺑ ﺸﺘﺮ ﻦﯾ ﻏﻠﻈﺖ از ﻫﺮ ﻓﻠﺰ ﮐﻪ ﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ آن ﻣﻘﺎوم ﺑﻮدﻧﺪ، ﺗﻠﻘﯿﺢ ﺷـﺪﻧﺪ و ﯿﻣﺎ ﯾ ﺰان ﺟﺬب ﺗﻮﺳﻂ دﺳﺘﮕﺎه اﺳﭙﮑﺘﺮوﻓﺘﻮﻣﺘﺮ در ﻃﻮل ﻣﻮج 9 600 nm ﺑﻤﺪت 14 روز ﺑﻪ ﻓﻮاﺻﻞ زﻣﺎﻧ ﯽ 24 ﺳﺎﻋﺖ، ODاﻧﺪازه ﮔ ﺮﯿ ي ﺷﺪ و ﻣﻨﺤﻨ ﯽ رﺷﺪ ﺗﺮﺳﯿﻢ ﮔﺮد ﺪﯾ (Hussein et al., 2005 .) ﺗﻌﯿﯿﻦ ﻣﯿﺰان ﺟﺬب ﻓﻠﺰات: ﺑﻪ ﻣﻨﻈﻮر ﺗﻌﯿﯿﻦ ﻣﯿﺰان ﺟﺬب ﻓﻠﺰات ﺗﻮﺳﻂ ﺑﺎﮐﺘﺮ ﻫﺎ ي ي ﻣﻮرد ﻧﻈﺮ، ﻧﻤﻮﻧﻪ ﻫﺎ ﻫﺮ 24 ﺳﺎﻋﺖ ﯾﮑﺒﺎر ﺳﺎﻧﺘﺮﯾﻔﻮژ ﮔﺮد ( هﺪﯾ در 10000 rpm ﺑﻪ ﻣﺪت 20 ﻘﻪﯿدﻗ ) و ﻣﺤﻠﻮل روﯾﯽ آن ﺟﻬﺖ ﺗﻌﯿﯿﻦ ﻣﯿﺰان ﺟﺬب ﻓﻠﺰ ﺗﻮﺳﻂ ﺑﺎﮐﺘﺮ ﯾو ي ﺎ ﺟﻬﺖ ﺗﻌﯿﯿﻦ ﻣﯿﺰان ﮐﺎﻫﺶ ﻓﻠﺰ در آن (در ﻣﻘﺎﯾﺴﻪ ﺑﺎ ﻣﯿﺰان ﻏﻠﻈﺖ ﻓﻠﺰ در ﻧﻤﻮﻧﻪ ﺷﺎﻫﺪ) ﺗﻮﺳﻂ دﺳﺘﮕﺎه ﺟﺬب در ﻃﻮل ﻣﻮﺟﻬﺎ ي ﻣﺨﺼﻮص ﺑﻪ ﻫﺮ ﻓﻠﺰ و ﻻﻣﭗ ﻣﺮﺑﻮﻃﻪ اﻧﺪازه ﮔ ﺮﯿ ي ﺷﺪ( ﮐﺎدﻣﯿﻮم در /228 8 ﻧﺎﻧﻮﻣﺘﺮ، 10 اﺗﻤ ﯽ ﺗﺮﻣﻮاﻟﻤﻨﺘﺎلﯿﻧ ﮑﻞ در 232 ﻧﺎﻧﻮﻣﺘﺮ و واﻧﺎدﯾﻮم در /318 5 ﻧﺎﻧﻮﻣﺘﺮ )(Hussein et al., 2005) .اﻧﺪازه ﮔ ﺮﯿ ي ﻓﻠﺰات در ﻓﺎز رﺳﻮﺑ ﯽ ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾ ﯾﯽ: ﺟﻬﺖ اﻧﺪازه ﮔ ﺮﯿ ي ﻏﻠﻈﺖ ﻓﻠﺰات در ﻓﺎز رﺳﻮﺑ ﯽ ﺣﺎﺻﻞ از ﺳـﺎﻧﺘﺮ ﯾﻔﻮژ ،ﯾاﻦ ﻓﺎز ﺑﻪ ﻣﺪت 24 ﺳﺎﻋﺖ در آون در دﻣﺎ ي 105 c ﻗﺮارداده ﺷﺪ. ﺳﭙﺲ ﺑﻪ 4 mg از وزن ﺧﺸﮏ آﻧﻬﺎ 5/0 ml اﺳـ ﺪ ﯿﯾﺘﺮﯿﻧ ﮏ ﻏﻠﯿﻆ اﺿﺎﻓﻪ ﮔﺮدﯾﺪ و در ﺣﻤﺎم آب 100 c ﺑﻪ ﻣﺪت 1 ﺳﺎﻋﺖ ﮔﺮﻣﺎﮔﺬار ي ﺷﺪﻧﺪ. ﺑﻌﺪ از اﯾـ ﻦ ﻣـﺪت ﻣﺨﻠـﻮط  6 Minimum Inhibition Concentration7 Minimum Bacteriocidal Concentration8 Brain Heart Infusion Broth9 Optical Density10 Thermo ElementalÑﺣﺎﺻﻞ در دﻣﺎ ي اﺗﺎق ﺳﺮد ﺷﺪه و ﺑﺎ آب ﻣﻘﻄﺮ ﺑﻪ ﺣﺠﻢ 5 ml رﺳﺎﻧﺪه ﺷﺪﻧﺪ و ﯿﻣ ﺰان ﺟﺬب ﻓﻠﺰ ﺑـﺎ اﺳـﺘﻔﺎده از دﺳـﺘﮕﺎه ﺟﺬب اﺗﻤ ﯽ ﺗﺮﻣﻮاﻟﻤﻨﺘﺎل اﻧﺪازه ﮔ ﺮﯿ ي ﺷﺪ ( Malekzadeh et al., 2002; Hussein et al., 2005 .) ﯿﺗﺜﺒ - ﺖ ﺳﻠﻮل ﻫﺎ ي ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾ ﯾﯽ در آﻟﮋﯾﻨﺎت ﺟﻬﺖ ﺗﺜﺒﯿﺖ ﺳﻠﻮﻟﻬﺎ ي آزاد ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾ ﯾﯽ، از آﻟﮋﯾﻨﺎت ﺳﺪﯾﻢ اﺳﺘﻔﺎده ﺷﺪ. ﺑﻪ ﻣﻨﻈﻮر آﻣﺎده ﺳﺎز ي ﺳﻠﻮل ﻫﺎ ﺗﺜﺒ ي ﯿـ ﺖ ﺷـﺪه در آﻟﮋﯾﻨﺎت (ﮔﻮﯾﭽﻪ ﻫﺎ ي ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾ ﯾﯽ) ﻣﺤﻠﻮل آﻟﮋﯾﻨﺎت %4 در ﻣﺤﯿﻂ ﮐﺸﺖ BHI broth ﯿﺗﻬ ﻪ ﺷـﺪ و دردﻣـﺎ ي 121 c ﺑـﻪ ﻣﺪت 15 ﻘﻪﯿدﻗ اﺗﻮﮐﻼو ﮔﺮد ، ﺪﯾ ﻓﺎز رﺳﻮﺑ ﯽ ﺣﺎﺻﻞ از ﺳﺎﻧﺘﺮﯾﻔﻮژ ﺳﻮﺳﭙﺎﻧﺴﯿﻮن ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾ ﯾﯽ ( در دور 5000 rpm ﺑﻪ ﻣـﺪت 10 ﻘﻪﯿدﻗ ) ﺑﻪ آن ﺗﻠﻘﯿﺢ ﮔﺮد ﺪ ﯾ و ﻣﺨﻠﻮط ﻓﻮق، ﺑﻪ ﺻﻮرت ﻗﻄﺮه ﻗﻄﺮه (ﺑﻪ ﮐﻤـﮏ ﺳـﻤﭙﻠﺮ ) ﺑـﻪ درون ﻣﺤﻠـﻮل 2/0 ﻣـﻮﻻر CaCl2 اﺳﺘﺮﯾﻞ و ﺳﺮد ﺑﺮ رو ﯿﺷ ي ﮑﺮ اﺿﺎﻓﻪ ﮔﺮد ﺪ ﯾ ﮐﻪ ﻧﺘﯿﺠﻪ آن ﺗﺸﮑ ﻞﯿ ﮔﻮﯾﭽﻪ ﻫﺎ ي ﮐﻮﭼﮏ ﻣﯿﮑﺮوﺑ ﯽ ﺑﻪ اﺑﻌﺎد 2 mmﺑـﻮد (Wang, 2004; Beshay, 2003). ﺳـﭙﺲ ﯾـ ا ﻦ ﮔﻮﯾﭽـﻪ ﻫـﺎ ﺑـﻪ ﻓﻼﺳـﮏ ﻫـﺎ ي ﺣـﺎو ي 100cc ﻣﺤـ ﯿﻂ ﮐﺸـﺖ BHI broth ﺣﺎو ي ﻓﻠﺰ ﻣﻨﺘﻘﻞ ﺷﺪﻧﺪ و در دﻣﺎ ي 30C در اﻧﮑﻮﺑﺎﺗﻮر ﺷﯿﮑﺮدار ﺑﺎ دور 120 rpm ﮔﺮﻣﺎﮔﺬار ي ﮔﺮدﯾﺪﻧﺪ .ﻫﻤﺮاه ﺑﺎ ﻧﻤﻮﻧﻪ ﻫﺎ ي ﻓﻮق ﯾﮏ ﺷـﺎﻫﺪ (ﻣﺤـ ﯿﻂ ﮐﺸـﺖ BHI broth ﻓﻠـﺰدار ﺑـﺪون ﺑـﺎﮐﺘﺮ ي ﯿـ ﻧ) ﺰ در ﻧﻈـﺮ ﮔﺮﻓﺘـﻪ ﺷـﺪ (Wang, 2004; Beshay, 2003). ﺑﺮاﺳﺎس ﻣﻨﺤﻨ ر ﯽ ﺷﺪ ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾ ﯾﯽ ﮐﻪ ﻗﺒﻼً ﺑﺮا ي ﻫﺮ ﺑﺎﮐﺘﺮ ي رﺳﻢ ﺷﺪه ﺑﻮد و ﺑﺮاﺳـﺎس زﻣﺎن ﺟﺬب ﻓﻠﺰ ﺗﻮﺳﻂ ﺑﺎﮐﺘﺮي، در ﻓﻮاﺻﻞ زﻣﺎﻧ ﯽ 48 ﺳﺎﻋﺘﻪ ﯿﻣ ﺰان ﻏﻠﻈﺖ ﻓﻠﺰ در ﻣﺤﻠﻮل روﯾﯽ ﺗﻮﺳـﻂ دﺳـﺘﮕﺎه ﺟـﺬب اﺗﻤ ﯽ اﻧﺪازه ﮔ ﺮﯿ ي ﺷﺪ و ﻣﯿﺰان ﮐﺎﻫﺶ ﻓﻠﺰ ﯾﺎدداﺷﺖ ﮔﺮدﯾﺪ ﮐﻪ اﯾﻦ روﻧﺪ ﺗﺎ زﻣﺎﻧﯿﮑﻪ ﻣﯿﺰان ﻓﻠﺰ در ﻣﺤﻠـﻮل رو ﯾـﯽ ﺛﺎﺑـﺖ ﺷﻮد ﯾﺎ ﮐﺎﻫﺶ ﯾﺎﺑﺪ، اداﻣﻪ ﯾﺎﻓﺖ . - ﺑﺮرﺳ ﯿﻣ ﯽ ﺰان ﺟـﺬب ﻓﻠـﺰ ﺗﻮﺳـﻂ ﺑﺎﮐﺘﺮ ﯾﻬـﺎ ي ﻣﺤﺒـﻮس ﺷـﺪه در آﻟﮋ ﯾﻨـﺎت ﺑﻮﺳـ ﯿﻠﻪ ﻣﯿﮑﺮوﺳـﮑﻮپ اﻟﮑﺘﺮوﻧـ ﯽﻧﮕﺎره(SEM ) اﺑﺘﺪا ﺑﺎﮐﺘﺮ ﻬﺎﯾ ي ﻣﺤﺒﻮس ﺷﺪه در آﻟﮋﯾﻨﺎت ﮐﻪ در ﻣﻌﺮض ﻏﻠﻈﺖ ﻫﺎ ي ﻣﺨﺘﻠﻒ ﻓﻠﺰ ي ﻗﺮار ﮔﺮﻓﺘﻪ ﺑﻮدﻧـﺪ ﺗﻮﺳـﻂ ﻣﺤﻠـﻮل ﮔﻠﻮﺗﺎرآﻟ ﺪ ﯿﺪﺋ و %2 اﺳﻤﯿﻮم ﺗﺘﺮاﮐﺴﺎ ﯿﺗﺜﺒ ﺪﯾ ﺖ و ﺑﺎ اﺳﺘﻔﺎده از اﺗﺎﻧﻮل (30-100 %) آﺑﮕ ﺮﯿ و ي ﺗﻮﺳﻂ ﯿﻧ ﺘﺮوژن ﻣـﺎ ﻊ ﯾ ﻓﺮﯾـ ﺰ وSEM) ﻣﺪل LEO 440i ﻣﻮرد 11 ﺑﺎ دﺳﺘﮕﺎه ﻓﺮﯾﺰدرا ﺮ ﯾ ﺧﺸﮏ ﺷﺪﻧﺪ .در ﭘﺎ ﺎنﯾ ﺗﻮﺳﻂ ﯿﻣ ﮑﺮوﺳﮑﻮپ اﻟﮑﺘﺮوﻧ ﯽ ﻧﮕﺎره (  .(Lopez - Jimenez and Leborgne, 2003; Beshay, 2003)ﮔﺮﻓﺘﻨﺪ ﻗﺮار ﯽ ﺑﺮرﺳ - ﺑﺮرﺳ ﯿﺗﺎﺛ ﯽ ﺮ ﮔﻮﯾﭽﻪ ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾ ﯾﯽ AWS4 در ﮐﺎﻫﺶ ﻏﻠﻈﺖ ﻓﻠﺰات در ﯾﮏ ﭘﺴﺎب آﻟﻮده ﺑﻪ ﻣﻨﻈﻮر ﮐﺎرﺑﺮد روش ﻫﺎ ياﺟﺮا ﺷﺪه در ﻣﺤﯿﻂ آزﻣﺎﯾﺸﮕﺎه و اﻧﺘﻘﺎل آن ﺑﻪ ﯾﮏ ﻣﺤﯿﻂ آﻟﻮده ﻃﺒ ( ﯽﻌﯿ آﻟﻮده ﺑﻪ ﻓﻠﺰات Cd،Ni و V ﯾ، ) ﮏ ﭘﺴﺎب آﻟﻮده ﺟﻬﺖ اﯾﻦ ﺑﺮرﺳ ﯽ ﻣﻮرد اﺳﺘﻔﺎده ﻗﺮار ﮔﺮﻓﺖ. ﯾﺑﺪ ﻦ ﻣﻨﻈﻮر ﻗﺒﻞ از وارد ﮐﺮدن ﮔﻮﯾﭽـﻪ ﻫـﺎ يﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾ ﯾﯽ ﺑﻪ ﭘﺴﺎب ﻣﻮرد ﻧﻈﺮ، ﻏﻠﻈﺖ ﻓﻠﺰات Cd, Ni و V در ﭘﺴﺎب اﻧﺪازه ﮔ ﺮﯿ ي ﺷﺪ. ﭘﺲ از اﺗﻮﮐﻼو ﭘﺴﺎب ﮑﯾ ، ﯽ از ﮔﻮﯾﭽﻪ ﻫﺎ ي ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾ ﯾﯽ ﯿﺗﻬ ﻪ ﺷﺪه از ﺳﻮﯾﻪ ﻫﺎ ي ﺑﺮﺗﺮ (ﮔﻮﯾﭽﻪ ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾ ﯾﯽ ﻣﺮﺑﻮط ﺑﻪ ﺑﺎﮐﺘﺮ ي AWS4 ،) در اﯾﻦ ﻣﺤـ ﯿﻂ ﻗـﺮار ﮔﺮﻓﺖ ودر دﻣﺎي30C در اﻧﮑﻮﺑﺎﺗﻮر ﺷـ ﯿﮑﺮدار ﺑـﺎ دور 120 rpm ﮔﺮﻣﺎﮔـﺬار ي ﺷـﺪ و در ﻓﻮاﺻـﻞ زﻣـﺎﻧ ﯽ ﻣﺨﺘﻠـﻒ و ﻣﺸﺨﺺ و 1 ،3 ،5 ،7( .... روز ﯿﻣ) ﺰان ﻏﻠﻈﺖ ﻓﻠﺰات در ﭘﺴﺎب ﻣﻮرد ﻧﻈﺮ ﺗﻮﺳﻂ دﺳـﺘﮕﺎه ﺟـﺬب اﺗﻤـ ﯽ اﻧـﺪازه ﮔ ﺮﯿـ يﮔﺮد ﺪﯾ (Wang, 2004 .)   11 Scanning Electron MicroscopyÒ - آزﻣﻮن ﻫﺎ ي ﺷﻨﺎﺳﺎﯾﯽ ﺳﻮﯾﻪ ﻫﺎ ي ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾ ﯾﯽ ﻣﻘﺎوم ﺑﻪ ﻓﻠﺰات ﺷﻨﺎﺳﺎﯾﯽ ﺳﻮﯾﻪ ﻫﺎ ي ﺟﺪا ﺷﺪه ﺗﻮﺳﻂ روﺷﻬﺎ ﻣ ي ﺘـﺪاول ﯿﻣ ﮑﺮوﺑﯿﻮﻟﻮژﯾـ ﮏ ﺷـﺎﻣﻞ روﺷـﻬﺎ ي رﻧـﮓ آﻣ ﺰﯿـ ي و آزﻣﻮﻧﻬـﺎ ي اﻧﺠﺎم ﺷﺪ و ﺗﻮﺳﻂ ﻣﺮﮐﺰ ﮐﻠﮑﺴﯿﻮن ﻗﺎرﭼﻬﺎ و ﺑﺎﮐﺘﺮي ﻫﺎي ﺳﺎزﻣﺎن ﭘﮋوﻫﺸﻬﺎ ي 12 ﯿﺑ ﻮﺷ ﺎﯿﻤﯿ ﯾﯽ ﺑﺮ اﺳﺎس ﮐﺘﺎب ﻣﺮﺟﻊ ﺑﺮﺟﯽ(PTCC) ﺪﯾﯿﺗﺎ ﺷﺪ . 13 ﻋﻠﻤ ﯽ و ﺻﻨﻌﺘ ﯽ اﯾﺮان  - ﻃﺮح آﻣﺎري ﺟﻬﺖ ﻣﺤﺎﺳﺒﺎت آﻣﺎر ي و رﺳﻢ ﻧﻤﻮدارﻫﺎ ي ﻣﺮﺑﻮﻃﻪ از روش آﻧﺎﻟ ﺰﯿ T-Testو ﻧﺮم اﻓﺰارﻫﺎ ي Excel و SPSS اﺳﺘﻔﺎده ﺷﺪ .ﯾاﻦ ﺑﺮرﺳ ﯽ ﻫﺎ ﺟﻬﺖ ﺗﻌﯿﯿﻦ اﺧﺘﻼف ﻣﻌﻨ ﯽ دار و ارﺗﺒﺎط ﺑﯿﻦ ﻣﯿﺰان ﺟﺬب ﻓﻠﺰات ﺳﻨﮕﯿﻦ ﮐﺮوم و ﻧﯿﮑﻞ و واﻧﺎدﯾﻮم در ﺳﻠﻮﻟﻬﺎ ي آزاد و ﻣﺤﺒﻮس ﺷﺪه ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾ ﯾﯽ، در ﻓﻮاﺻﻞ زﻣﺎﻧ ﯽ ﻣﺨﺘﻠﻒ و ﯿﻧ ﺰ ﺑﻪ ﮐﻤﮏ روش ﺿﺮﯾﺐ ﻫﻤﺒﺴﺘﮕ ﯽ Pearson اﻧﺠﺎم ﺷﺪ . ﯿﻧﺘ ﺠﻪ ﺮﯿﮔ ي از آزﻣﺎﯾﺸﺎت ﺻﻮرت ﮔﺮﻓﺘﻪ در ﻃ ﯽ ﻣﺮاﺣﻞ اﯾﻦ ﺗﺤﻘﯿﻖ ﻧﺘﺎﯾﺞ ذﯾﻞ ﺣﺎﺻﻞ ﮔﺮد : ﺪﯾ - در ﻧﺘﯿﺠﻪ ﮐﺸﺖ ﻧﻤﻮﻧﻪ ﻫﺎ ي آب و رﺳﻮب رو ي ﻣﺤﯿﻂ BHI agar ﺣﺎو ي ﻓﻠﺰات ﺳﻨﮕﯿﻦ ﻧﯿﮑﻞ، ﮐﺎدﻣﯿﻮم و واﻧـﺎد ﯾﻮم، 22 ﺳﻮﯾﻪ ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾ ﯾﯽ ﺟﺪاﺳﺎز ي ﺷﺪ ﮐﻪ در اﯾﻦ ﺟﺪاﺳﺎز ﻪ ﯿاوﻟ ي 5 ﺳﻮ ﻪ ﯾ ﺑﺎﮐﺘﺮ ي ﻣﻘﺎوم ﺑﻪ 6 Ni، ﺳﻮ ﻪﯾ ﻣﻘـﺎوم ﺑـﻪ 6 Cd، ﺳﻮ ﻪﯾ ﻣﻘﺎوم ﺑﻪ 5 V و ﺳﻮ ﻪﯾ ﻣﻘﺎوم ﺑﻪ ﻫﺮ ﺳﻪ ﻓﻠﺰ ﺑﻮد .ﻧﺪ - در اﻧﺘﺨﺎب ﻣﻨﺎﺳﺒﺘﺮﯾﻦ ﺳﻮﯾﻪ ﻫﺎ ي ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾ ﯾﯽ ﻣﻘﺎوم ﺑﻪ ﻓﻠﺰات و ﺑﺮرﺳ ﯽ ﻣﻘﺎوﻣﺖ ﺑﺎﮐﺘﺮ ي در ﺑﺮاﺑﺮ ﻏﻠﻈﺖ ﻫﺎ ي ﻣﺨﺘﻠـﻒ ، در ﺑﯿﻦ ﺑﺎﮐﺘﺮ ﻫﺎ ي ي ﮐﺸﺖ داده ﺷﺪه در ﻣﺤﯿﻂ BHI broth ﻓﻠﺰي، ﺑﺎﮐﺘﺮ ﻫﺎ ي ي ﻣﺮﺑﻮط ﺑﻪ آب ﻓﻘـﻂ در ﻏﻠﻈـﺖ ﻫـﺎ ي5 15 ppm- رﺷﺪ داﺷﺘﻨﺪ و ﺑﺎﮐﺘﺮ ﻫﺎ ي ي ﻣﺮﺑﻮط ﺑـﻪ رﺳـﻮﺑﺎت در ﻏﻠﻈـﺖ ﻫـﺎ ي 20 ppm و 20-100 ppm -5 رﺷـﺪ داﺷﺘﻨﺪ ﮐﻪ در اﯾﻦ ﻣﺮﺣﻠﻪ از ﺗﺤﻘﯿﻖ ﺑﺎﮐﺘﺮ ﻫﺎ ي ﯾﯽ ﮐﻪ ﺗﻮاﻧﺴﺘﻪ ﺑﻮدﻧﺪ ﻏﻠﻈﺖ ﻫﺎ ي ﺑﺎﻻﺗﺮ از 40 ppm ﻓﻠﺰات را ﺗﺤﻤﻞ ﮐﻨﻨﺪ ﺟﻬﺖ ﻏﺮﺑـﺎﻟﮕﺮ ي و ﺑﺮرﺳـ ﯽ ﻫـﺎ ﯿﺑ ي ﺸـﺘﺮ اﻧﺘﺨـﺎب ﺷـﺪﻧﺪ . ﺑـﺎﮐﺘﺮ ي ﻫـﺎ ي AWS3 ، AWS2-1 ،AWS1-1 ،AWS1، AWS4 ،AWS3-1 و AWS4-1 در اﯾﻦ ﻣﺮﺣﻠﻪ از آزﻣﺎﯾﺶ ﺑﻪ ﻋﻨﻮان ﺑﺎﮐﺘﺮ ﻬﺎﯾ ي ﻣﻘﺎوم اﻧﺘﺨﺎب ﺷﺪﻧﺪ . ﻧﺘـﺎ ﯾﺞ ﻣﻘﺎوﻣـﺖ ﯾاﻦ ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﻬﺎ ﺑﻪ ﻏﻠﻈﺖ ﻫﺎ ي ﻣﺨﺘﻠﻒ ﻓﻠﺰ ي و ﻧﺘﺎﯾﺞ ﻣﺮﺑﻮط ﺑﻪ MIC و MBC ﻫﺮ ﯾﮏ از آﻧﻬﺎ در ﺟﺪول 1 آﻣﺪه اﺳﺖ . 12 Bergeys Manual of Systematic Bacteriology 13 Persian Type Culture CollectionÓ - ﻣﻨﺤﻨ ﯽ رﺷﺪ ﺗﻮﺳﻂ اﻧﺪازه ﮔ ﺮﯿ ي OD ﺑﺎ دﺳﺘﮕﺎه اﺳﭙﮑﺘﺮوﻓﺘﻮﻣﺘﺮ Spectronic Genesys5 در ﻃﻮل ﻣﻮج 600 nm و ﻫﻤﭽﻨ ﻦﯿ اﻧﺪازه ﮔ ﺮﯿ ﯿﻣ ي ﺰان ﺟﺬب ﻓﻠﺰات ﺗﻮﺳﻂ دﺳﺘﮕﺎه ﺟﺬب اﺗﻤ ﯽ ﺗﺮﻣﻮاﻟﻤﻨﺘﺎل ﺑﺮا ي ﻫـﺮ ﻓﻠـﺰ در ﻃـﻮل ﻣﻮﺟ ﻬـﺎ يﻣﺨﺼﻮص ﺑﻪ ﻫﺮ ﻓﻠﺰ( ﮐﺎدﻣﯿﻮم در /228 8 ﻧﺎﻧﻮﻣﺘﺮ، ﻧﯿﮑﻞ در 232 ﻧﺎﻧﻮﻣﺘﺮ و واﻧﺎدﯾﻮم در /318 5 ﻧﺎﻧﻮﻣﺘﺮ ) و ﻻﻣﭗ ﻣﺮﺑﻮﻃﻪ ﺑﺮا 7 ي ﺳﻮ ﻪﯾ ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾ ﯾﯽ اﻧﺘﺨﺎﺑ ﯽ در ﻓﻮاﺻﻞ زﻣﺎﻧ ﯽ 1 14- روز رﺳﻢ و اﻧﺪازه ﮔ ﺮﯿ ي ﮔﺮد .ﺪﯾ ﺗﻤﺎﻣ ﯽ ﺑﺎﮐﺘﺮ ي ﻫـﺎ در ﺣﻀـﻮر ﻏﻠﻈﺖ ﻓﻠﺰات ﻣﺮﺑﻮﻃﻪ (آﺧﺮﯾﻦ ﻏﻠﻈﺘ ﯽ از ﻓﻠﺰ ﮐﻪ ﺑﺎﮐﺘﺮ ي در آن رﺷﺪ ﮐﺮده ﺑﻮد) رﺷﺪ داﺷﺘﻨﺪ و ﻫﯿﭻ ﮐﺎﻫﺸ ﯽ در رﺷﺪ آﻧﻬﺎ در ﺣﻀﻮر ﻓﻠﺰ ﻣﺸﺎﻫﺪه ﻧﺸﺪ وﻟ. ﯽ ﺳﻮﯾﻪ ﻫﺎيAWS4 ،AWS3 ، AWS1 رﺷﺪ ﺑﯿﺸـﺘﺮ ي ﻧﺴـﺒﺖ ﺑـﻪ ﺳـﺎ ﯾﺮ ﺳـﻮ ﯾﻪ ﻫـﺎ و ﻫﻤﭽﻨﯿﻦ ﺑﯿﺸﺘﺮﯾﻦ ﮐﺎﻫﺶ را در ﻣﯿﺰان ﻏﻠﻈﺖ ﻓﻠﺰات ﻣﻮرد ﻧﻈﺮ داﺷﺘﻨﺪ ( ﺷﮑﻞ .)1  ﻣﺸـﺎﻫﺪه ﮔﺮد ﯾـ ﺪ ﮐـﻪ ﺑـﻪ 14 در ﻫﺮ 3 ﺑﺎﮐﺘﺮ ي ﻓﻮق ﯿﺑ ﺸﺘﺮﯾﻦ ﮐﺎﻫﺶ ﻏﻠﻈﺖ ﻓﻠﺰات در ﻣﺤﻠﻮل روﯾﯽ، در اﺑﺘﺪا ي ﻓـﺎز رﮐـﻮد ﻣﻮازات آن ﺑﯿﺸﺘﺮﯾﻦ ﺟﺬب ﺗﻮﺳﻂ ﺳﻠﻮل ﻫﺎ ي ﺑﺎﮐﺘﺮ ﯽﯾﺎﯾ ﺻﻮرت ﮔﺮﻓﺘﻪ اﺳﺖ و ﭘﺲ از آن ﮐﻪ ﺑﺎﮐﺘﺮ ي وارد ﻣﺮﺣﻠﻪ ﻣـﺮگ ﺷﺪ ه، رﺷﺪ ﮐﺎﻫﺶ ﯾﺎﻓﺘﻪ و ﻏﻠﻈﺖ ﻓﻠﺰ در ﻣﺤﻠﻮل روﯾﯽ ﺑﻪ ﻋﻠﺖ ﻣﺮگ ﺑﺎﮐﺘﺮ ي و ﻣﺘﻼﺷ ﯽ ﺷﺪن آن و ﭘﺲ دادن ﻓﻠﺰ ﺟﺬب ﮐﺮده ﺑﻪ ﻣﺤﯿﻂ، ﻣﺠﺪداً اﻓﺰاﯾﺶ ﯾﺎﻓﺖ. ﺑﺎ ﻣﺤﺎﺳﺒﻪ اﻧﺠﺎم ﺷﺪه ﻣﯿﺰان ﮐﺎﻫﺶ Cd و Ni ﺗﻮﺳﻂ ﺳـﻠﻮل ﻫـﺎ ي آزاد ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾـ ﯾﯽ AWS1 ، ﺑﻪ ﺗﺮﺗﯿﺐ 45 ﯿﻣ ،% 5/6 و % ﺰان ﮐﺎﻫﺶ ﻏﻠﻈﺖ V ﺗﻮﺳﻂ ﺳﻠﻮل ﻫﺎ ي آزاد ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾـ ﯾﯽ 10 ،AWS3 و % ﻣﯿـﺰان ﮐﺎﻫﺶ 17 Ni % ، 60 Cd % و32 V % ﺗﻮﺳﻂ ﺳﻠﻮل ﻫﺎ ي آزاد ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾ ﯾﯽ AWS4 در روز ﻫﻔﺘﻢ ﻣﺸﺎﻫﺪه ﺷﺪ. ﺑﻨـﺎﺑﺮا ﻦﯾ ،  3 ﻦﯾا ﺳﻮﯾﻪ ﺟﻬﺖ ﺑﺮرﺳ ﻫﺎ ﯽ ﯿﺑ ي ﺸﺘﺮ اﻧﺘﺨﺎب ﮔﺮدﯾﺪﻧﺪ .  - ﺑﺮرﺳ ﯿﺗﺎﺛ ﯽ ﺮ ﺳﻠﻮل ﻫ يﺎ ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾ ﯾﯽ ﻣﺤﺒﻮس ﺷﺪه در آﻟﮋﯾﻨﺎت در ﺟﺬب ﻓﻠﺰات در ﻣﺤﯿﻂ ﻫﺎ ي ﻓﻠﺰ ي ﺑـﺎ ﻏﻠﻈـﺖ ﻫـﺎ يﻣﺨﺘﻠﻒ ﻓﻠﺰ ي 80 ppm از Cd و 40ppm ،Ni از V و 100ppm از ﻫﺮ ﺳﻪ ﻓﻠﺰ، در ﻣﻘﺎﯾﺴﻪ ﺑﺎ ﻣﺤﯿﻂ ﺷـﺎﻫﺪ ( ﻣﺤـ ﯿﻂ BHI broth ﻓﻠﺰ دار ﺑﺪون ﮔﻮﯾﭽﻪ ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾ ﯾﯽ) ﻧﺸﺎن داد ﮐﻪ ﮔﻮﯾﭽﻪ ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾـ ﯾﯽ AWS1 ﺑﺎﻋـﺚ ﮐـﺎﻫﺶ ﻏﻠﻈـﺖ Cd ﺑـﻪ ﯿﻣ ﺰان90% در روز دوم و Ni ﺑﻪ ﻣﯿﺰان 45% در روز ﭘﻨﺠﻢ ﺗﺎ ﻫﻔﺘﻢ، ﮔﻮﯾﭽﻪ ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾ ﯾﯽAWS3 ﺑﺎﻋﺚ ﮐﺎﻫﺶ ﻏﻠﻈﺖ V ﺑـﻪ ﯿﻣ ﺰان100 % در روز ﭘﻨﺠﻢ ﺗﺎ ﻧﻬﻢ ﮔﺮدﯾﺪ و ﺑﺎﮐﺘﺮ ي AWS4 ﮐﺎدﻣﯿﻮم را ﺑﻪ ﻣﯿﺰان90% در روز دوم، ﻧﯿﮑﻞ را ﺑﻪ ﻣﯿﺰان 50% در روز ﭘﻨﺠﻢ و واﻧﺎدﯾﻮم را ﺑﻪ ﻣﯿﺰان 95% در روز ﻫﻔﺘﻢ ﮐﺎﻫﺶ داد . - ﺑﺮرﺳ ﯽ ﺳﺎﺧﺘﺎر دروﻧ ﯽ و ﺑﯿﺮوﻧ ﯽ ﮔﻮﯾﭽﻪ ﻫﺎ ي آﻟﮋﯾﻨﺎت ﺳﺪﯾﻢ واﺟﺪ ﺳﻠﻮﻟﻬﺎ ي ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾ ﯾﯽ ﺗﻮﺳﻂ ﯿﻣ ﮑﺮوﺳﮑﻮپ اﻟﮑﺘﺮوﻧ ﯽﻧﮕﺎره ﻧﺸﺎن داد ﮐﻪ ﺳﻠﻮل ﻫﺎ ي ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾ ﯾﯽ ﺑﻪ ﻃﻮر ﺗﺼﺎدﻓ ﯽ در ﮔﻮﯾﭽﻪ ﻫﺎ ي آﻟﮋﯾﻨﺎت ﺗﻮزﯾﻊ ﺷﺪﻧﺪ. ﻫﻤﭽﻨﯿﻦ ﻓﻠﺰاتV و Ni و Cd در ﻧﻮاﺣ ﯽ ﺣﺎو ي ﺑﺎﮐﺘﺮ ي و ﻓﺎﻗﺪ ﺑﺎﮐﺘﺮ ي ﺗﻮﺳﻂ ﯾاﻦ ﻣﯿﮑﺮوﺳﮑﻮپ ﺟﺴﺘﺠﻮ ﺷﺪ ﻧﺪ ﮐﻪ ﺑﯿﺸﺘﺮﯾﻦ ﻏﻠﻈﺖ ﻓﻠـﺰات در ﻣﻨﺎﻃﻖ واﺟﺪ ﺑﺎﮐﺘﺮ ي ﻣﺸﺎﻫﺪه ﮔﺮد ( ﺪﯾ ﺷﮑﻞ .)3 - ﻫﻮﯾﺖ ﺑﺎﮐﺘﺮ ﻫﺎ ي ي ﻓﻮق ﺑﻪ روش ﻫﺎ ي ﻣﺘﺪاول ﻣﯿﮑﺮوﺑﯿﻮﻟﻮژﯾﮏ ﻣﻮرد ﺑﺮرﺳ ﯽ ﻗـﺮار ﮔﺮﻓـﺖ ﮐـﻪ ﻣﺸﺨﺼـﺎت آﻧﻬـﺎ در ﺟﺪول 2 آﻣﺪه اﺳﺖ .ﺑــﺎ ﺗﺎﯾﯿــﺪ ﮐﻠﮑﺴــﯿﻮن ﻣﯿﮑﺮوﺑــ ﯽ ﺳــﺎزﻣﺎن ﭘﮋوﻫﺸــﻬﺎ ي ﻋﻠﻤــ ﯽ و ﺻــﻨﻌﺘ ﯾــا ﯽ ﺮان ﺳــﻮﯾﻪ ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾــ ﯾﯽ AWS1 ﺑــﺎﮐﺘﺮ ي Bacillus cereus PTTC 1665 ي ﺑﺎﮐﺘﺮ AWS3 ﯾﯽ ﺎﯾ ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺳﻮﯾﻪ ، Pseudomonas putide PTTC 1664و ﺳﻮﯾﻪ ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾـ ﯾﯽ AWS4 ﺑـﺎﮐﺘﺮ ي Pseudomonas pseudoalkaligenes PTTC 1666 ﺷﻨﺎﺳـﺎ ﯾﯽ ﺷـﺪﻧﺪ . 14 StationaryÔﯿﺗﺎﺛ - ﺮﮔﻮﯾﭽﻪ ﺑﺎﮐﺘﺮ ﺎﯾ ﯾﯽ Pseudomonas pseudoalkaligenes PTTC 1666 در ﮐﺎﻫﺶ ﻏﻠﻈﺖ ﻓﻠﺰات Ni ،CdوV در ﯾﮏ ﭘﺴﺎب آﻟﻮده ﺑﺎ ﻏﻠﻈﺖ 100 ppm از ﻓﻠﺰات ﻓﻮق ﻣﻮرد ﺑﺮرﺳ ﯽ ﻗﺮار ﮔﺮﻓﺖ ﮐﻪ ،ﺞﯾﻧﺘﺎ ﮐﺎﻫﺶ ﻗﺎﺑﻞ ﻣﻼﺣﻈﻪ ا ياز ﻏﻠﻈﺖ ﻓﻠﺰات را ﻧﺸﺎن داد .ﮔﻮﯾﭽﻪ ﺑﺎﮐﺘﺮ ي Pseudomonas pseudoalkaligenes ﮐﺎدﻣﯿﻮم را ﺑـﻪ ﻣ ﯿـ ﺰان 90% در روز دوم، ﻧﯿﮑﻞ را ﺑﻪ ﻣﯿﺰان 50% در روز ﭘﻨﺠﻢ و واﻧﺎدﯾﻮم را ﺑﻪ ﻣﯿﺰان 95% در روز ﻫﻔﺘﻢ در ﭘﺴﺎب آﻟﻮده ﺑـﻪ ا ﯾـ ﻦ ﻓﻠـﺰات ﮐﺎﻫﺶ داد . - ﻃﯽ ﺑﺮرﺳﯽ ﻫﺎي آﻣﺎري ﺻﻮرت ﮔﺮﻓﺘﻪ ﻧﺘﺎﯾﺞ ﻧﺸﺎن داد ﮐﻪ ﺿﺮﯾﺐ ﻫﻤﺒﺴﺘﮕﯽ ﺑﯿﻦ اﺛﺮ ﻣﻮاد (ﻓﻠﺰات) و ﺳـﻠﻮل ﻫـﺎي آزاد ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﺎﯾﯽ در روزﻫﺎي ﻣﺨﺘﻠﻒ ﻣﻨﻔﯽ ﺑﻮد. ﯾﻌﻨﯽ ﺑﺎ اﻓﺰاﯾﺶ رﺷﺪ ﺑﺎﮐﺘﺮي ﺟﺬب ﻓﻠﺰ ﺗﻮﺳﻂ آﻧﻬـﺎ ﻣﺘﻐﯿـﺮ ﺑـﻮده و ﺑـﻪ ﺻـﻮرت ﺧﻄﯽ ، ﺗﺼﺎﻋﺪي و ﯾﺎ ﻧﺰوﻟﯽ ﻧﺒﻮده اﺳﺖ . ﺿﺮﯾﺐ ﻫﻤﺒﺴﺘﮕﯽ ﺑﯿﻦ اﺛﺮ ﻣﻮاد (ﻓﻠﺰات) و ﮔﻮﯾﭽﻪ ﻫـﺎي ﺑﺎﮐﺘﺮﯾـﺎﯾﯽ در روزﻫـﺎي ﻣﺨﺘﻠﻒ ﻣﺜﺒﺖ ﺑﻮد. ﯾﻌﻨﯽ در روزﻫﺎي ﻣﺨﺘﻠﻒ راﺑﻄﻪ ﺟﺬب ﻓﻠﺰ و رﺷﺪ ﺑﺎﮐﺘﺮي ﺑﻪ ﺻﻮرت ﺛﺎﺑﺖ ﺑﻮده و اﺧﺘﻼﻓﺎت ﮐﻢ ﺑﻮده اﺳﺖ . اﺧﺘﻼف ﻣﻌﻨﯽ داري ﺑﯿﻦ اﺛﺮ ﻣﻮاد ﻣﺨﺘﻠﻒ (ﻓﻠﺰات) ﺑﺮ روي ﺳﻠﻮل ﻫﺎي آزاد ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﺎﯾﯽ در روزﻫﺎي دوم، ﭘﻨﺠﻢ، ﻫﻔﺘﻢ، ﻧﻬﻢ، دوازدﻫﻢ و ﭼﻬﺎردﻫﻢ ﻣﺸﺎﻫﺪه ﻧﮕﺮدﯾﺪ. ﯾﻌﻨﯽ ﮐﻢ ﯾﺎ زﯾﺎد ﺷﺪن رﺷﺪ ﺑﺎﮐﺘﺮي ﻫﺎ ﺗﺎﺛﯿﺮي در ﺟﺬب ﻓﻠـﺰ ﻧﺪاﺷـﺘﻪ اﺳـﺖ .ﻫﻤﭽﻨﯿﻦ اﺧﺘﻼف ﻣﻌﻨﯽ داري ﺑﯿﻦ اﺛﺮ ﻣﻮاد ﻣﺨﺘﻠﻒ (ﻓﻠﺰات) ﺑﺮ روي ﮔﻮﯾﭽﻪ ﻫﺎي ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﺎﯾﯽ در روزﻫﺎي دوم، ﭘﻨﺠﻢ، ﻫﻔﺘﻢ، ﻧﻬﻢ، دوازدﻫﻢ و ﭼﻬﺎردﻫﻢ ﻣﺸﺎﻫﺪه ﻧﮕﺮدﯾﺪ . ﺑﺤﺚ ﺑﺎ ﺗﻮﺟﻪ ﺑﻪ ﺗﻨﻮع ﻣﺘﺎﺑﻮﻟﯿﮑﯽ ﻣﯿﮑﺮوارﮔﺎﻧﯿﺴﻤﻬﺎ و ﺗﻮان اﺳﺘﻔﺎده آﻧﻬﺎ از آﻻﯾﻨﺪه ﻫﺎي ﻣﺤﻄﯿ ﯽ ﺑﻪ ﻋﻨﻮان ﻣﻨﺎﺑﻊ ﻏﺬاﯾﯽ و ﺗﻮاﻧﺎﯾﯽ ﺗﺒﺪﯾﻞ آﻧﻬﺎ ﺑﻪ ﻓﺮﻣﯽ ﺑﺎ ﭘﺎﯾﺪاري ﺑﯿﺸﺘﺮ و ﺳﻤﯿﺖ ﮐﻤﺘﺮ ﯾﺑﺎ ، ﮏ اﻧﺘﺨﺎب ﻣﻨﺎﺳﺐ ﻣﯽ ﺗﻮان از آﻧﻬﺎ در ﺗﺠﺰ ،ﻪﯾ ﺟﺬب و ﺣـﺬف ﯾآﻻ ﻨﺪه ﻫﺎي ﻣﺨﺘﻠﻒ ﺳﻮد ﺑﺮد(Hong and Shan shan, 2005; Chen et al.,2005). در ﺳﺎﻟﻬﺎي اﺧﯿﺮ، ﺗﻨﻮﻋﯽ از ﮔﻮﻧﻪ ﻫﺎي ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﺎﯾﯽ ﮐﻪ در ﺗﺠﻤﻊ ﻓﻠﺰات ﻣﺨﺘﻠﻒ ﻧﻘﺶ دارﻧﺪ ﺗﻮﺳﻂ ﻣﺤﻘﻘﯿﻦ ﻣﺨﺘﻠﻒ ﺷﺮح داده ﺷﺪه اﺳﺖ . و Wong (، Lyer et al., 2004 ) ﺳﻮﺑﺘﻠﯿﺲ ﺑﺎﺳﯿﻠﻮس ﺑﻮﺳﯿﻠﻪ را Cu و Zn, Pb ﺗﺠﻤﻊ (2001) ﻫﻤﮑﺎران و Costaﻫﻤﮑﺎران (1993) ﺗﺠﻤﻊ Cu را ﺗﺎ 5/6 % وزن ﺧﺸـﮏ در Pseudomonas putide II-11، ﻣﻠـﮏ زاده و ﻫﻤﮑـﺎران (2002 ) ﺗﺠﻤــﻊ اوراﻧﯿــﻮم ﺗــﺎ 174 mg/g وزن ﺧﺸــﮏ ﺗــﻮده ﺑﺎﮐﺘﺮﯾــﺎﯾﯽ را در Pseudomonas MGF-48 و  ﺳـﻨﮕﯿﻦ ﻓﻠﺰات ﻏﻠﻈﺖ 100 mg/l در (% )8 Co و (%20 ) Cu (%، 65 ) Cd ﺗﺠﻤﻊ (2004) ﻫﻤﮑﺎران و Anita Lyerﺗﻮﺳﻂ اﮔﺰوﭘﻠﯽ ﺳﺎﮐﺎرﯾﺪ ﺑﺎﮐﺘﺮيEnterobacter cloacea ﺟﺪا ﺷﺪه از ﺳﻮاﺣﻞ ﻏﺮﺑﯽ ﻫﻨﺪ، ﻧﺸﺎن دادﻧﺪ .Hussein و ﻫﻤﮑﺎران (2004 ﮔ) ﻮﻧﻪ ﻫﺎﯾﯽ از ﺟﻨﺲ ﺳﻮدوﻣﻮﻧﺎس را از ﭘﺴﺎب ﺟﺪا ﮐﺮدﻧﺪ ﮐﻪ ﮔﺮوﻫﯽ از آﻧﻬﺎ ﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ ﻧﺪ. ﺑﻮد ﻣﻘﺎوم 10 mM /l ﻣﯿﺰان ﺑﻪ Cd ﻫﻤﭽﻨﯿﻦ و 5 mM/l ﻣﯿﺰان ﺑﻪ Ni 3 ، mM/l ﻣﯿﺰان ﺑﻪ Cu و Cr (%40 - 50 ) Cd و (% )6- 5 Ni ﺗﺠﻤـﻊ ﺿـﺮﯾﺐ ﺑﺎ Pseudomonas putide PTTC 1664 ﺳﻮﯾﻪ ﺗﺤﻘﯿﻖ اﯾﻦ در 40ppm ﻏﻠﻈـﺖ در (% 10 - 12 ) V ﺗﺠﻤـﻊ ﺿـﺮﯾﺐ ﺑـﺎ Bacillus cereus PTTC 1665 و 80ppm ﻏﻠﻈـﺖ دراﯾﺰوﻟﻪ ﺷﺪ و ﯾﮏ ﺳﻮﯾﻪ Pseudomonas pseudoalkaligenes PTTC 1666 ﺑـﺎ ﺿـﺮﯾﺐ ﺟـﺬب ﻫـﺮ ﺳـﻪ ﻓﻠـﺰ (Cd %60,Ni %17, V %32) در ﻏﻠﻈﺖ 100ppm ﺟﺪاﺳﺎزي و ﺷﻨﺎﺳﺎﯾﯽ ﺷﺪ ﮐﻪ اﯾﻦ ﻣﯿﺰان ﺟﺬب ﺑﺎ ﻧﺘـﺎﯾﺞ ﻣﺤﻘﻘـﯿﻦ ﻓﻮق ﻗﺎﺑﻞ ﻗﯿﺎس ﻣﯽ ﺑﺎﺷﺪ. اﻫﻤﯿﺖ اﯾـﻦ ﺗﺤﻘﯿـﻖ در ﻣﻘﺎﯾﺴـﻪ ﺑـﺎ ﻣﻄﺎﻟﻌـﺎت اﻧﺠـﺎم ﯾﺎﻓﺘـﻪ دﯾﮕـﺮ، ﺟﺪاﺳـﺎزي ﮔﻮﻧـﻪ اي از ﺳﻮدوﻣﻮﻧﺎس ﺑﺎ ﺗﻮاﻧﺎﯾﯽ ﮐﺎﻫﺶ ﻫﻤﺰﻣﺎن ﺳﻪ ﻓﻠﺰ در ﻣﺤﯿﻂ ﺑﻮد. Õدر اﯾﻦ ﺑﺮرﺳﯽ ﺑﯿﺸﺘﺮﯾﻦ ﺟﺬب ﻓﻠﺰ دراﺑﺘﺪاي ﻣﺮﺣﻠﻪ رﮐﻮد ﻣﺸﺎﻫﺪه ﺷﺪ ﮐﻪ ﻧﺸﺎﻧﻪ اﺳﺘﻔﺎده اﯾﻦ ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﻬـﺎ از ﻓﻠـﺰات ﻓـﻮق ﺟﻬﺖ ﺗﻮﻟﯿﺪ ﻣﺘﺎﺑﻮﻟﯿﺘﻬﺎي ﺛﺎﻧﻮﯾـﻪ ﻣـﯽ ﺑﺎﺷـﺪ ﮐـﻪ اﯾـﻦ ﻧﺘﯿﺠـ ﻪ ﺑـﺎ ﻧﺘـﺎﯾﺞ ﻣﻠـﮏ زاده و ﻫﻤﮑـﺎران (2002) ﻫﻤﺴـﻮﯾﯽ دارد  .(Malekzadeh et al., 2002 ; Pongratz et al., 1999 )ﻣﯿﺰان ﺟﺬب ﻓﻠﺰات ﺗﻮﺳﻂ ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﻬﺎي ﻣﺤﺒﻮس ﺷﺪه در ﮔﻮﯾﭽﻪ ﻫﺎي آﻟﮋﯾﻨـﺎت ﺳـﺪﯾﻢ ﺑـﻪ ﺧﺼـﻮص در ﻣـﻮرد ﺑـﺎﮐﺘﺮي Pseudomonas pseudoalkaligenes PTTC 1666 ﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﻬـﺎي آزاد ﭼ ﺸـﻤﮕﯿﺮﺗﺮ ﺑـﻮد (Cd را 90 ،% .(100 ppm در %95 را V و %50 را Ni (ﺰﻧﯿ 1993 ) So و Wong ( و 1991) ﻫﻤﮑﺎران و Marques و (1989) Malone ( و 1984 ) Dean و Macaskieﺗﺠﻤﻊ ﯿﻃﻒ وﺳﯿﻌﯽ از ﻓﻠﺰات ﺳﻨﮕﯿﻦ ﺷﺎﻣﻞ ﻓﻠﺰاﺗﯽ از ﺧﺎﻧﻮاده اوراﻧﯿﻮم را ﺗﻮﺳﻂ ﺳﻠﻮل ﻫﺎي ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﺎﯾﯽ ﻣﺤﺒﻮس ﺷﺪه در آﻟﮋﯾﻨﺎت ﻧﺸﺎن دادﻧﺪ. اﯾﻦ ﺗﺤﻘﯿﻘﺎت ﻧﺸﺎن داد ﮐﻪ اوراﻧﯿﻮم و ﻓﻠﺰات دﯾﮕﺮ ﻧﻈﯿﺮ Cd، ﺳﺮب و ﻧﻘﺮه ﻣﯽ ﺗﻮاﻧﻨﺪ ﺗﻮﺳﻂ ﺳﻠﻮل ﻫﺎي ﭘﯿﺶ رﺷﺪ در ژل ﻫﺎي ﭘﻠﯽ اﮐﺮﯾﻞ آﻣﯿﺪ ﺑﺮداﺷﺖ ﺷﻮﻧﺪ. ﻣﻠﮏ زاده وﻫﻤﮑﺎران (2002) ﺑﯿﺶ از90% ﺑﺮداﺷﺖ اوراﻧﯿﻮم را ﺑﻮﺳﯿﻠﻪ ﺳﻠﻮل ﻫﺎي ﻣﺤﺒﻮس ﺷﺪه در ژل ﭘﻠﯽ اﮐﺮﯾﻞ آﻣﯿﺪ ﮔﺰارش ﮐﺮدﻧﺪ . ﻣﻄﺎﻟﻌﺎت2003 ) Beshay) ﻧﺸﺎن ﻣـﯽ دﻫـﺪ ﮐﻪ ﺟﺬب ﻓﻠﺰات ﺗﻮﺳﻂ ﺳﻠﻮل ﻫﺎي ﻣﺤﺒﻮس ﺷﺪه ﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ ﺳﻠﻮل ﻫﺎي آزاد ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﺎﯾﯽ ﺑﺮﺗـﺮ و ﺑﻬﺘـﺮ ﺑـﻮده و ﻣﻨﺠـﺮ ﺑـﻪ ﻓﻌﺎﻟﯿﺖ ﻫﺎي ﺣﺠﻤﯽ ﺑﺎﻻﺋﯽ در زﻣﺎن ﺟﺬب ﻣﯽ ﮔﺮدد( ﺷﮑﻞ .)2 ﺑﺎ اﺳﺘﻔﺎده از ﻣﯿﮑﺮوﺳﮑﻮپ اﻟﮑﺘﺮوﻧﯽ ﻧﮕﺎره آراﯾﺶ اﺗﻔﺎﻗﯽ ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﻬﺎ ﻣﺤﺒﻮس ﺷﺪه در آﻟﮋﯾﻨﺎت و ﺟﺴﺘﺠﻮي ﻣﯿـﺰان ﻓﻠـﺰات ﮐﺎدﻣﯿﻮم، ﻧﯿﮑﻞ و واﻧﺎدﯾﻮم در اﯾﻦ ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﻬﺎ ﻧﺸﺎن داده ﺷﺪ ﮐﻪ ﺑﺎ ﻣﻄﺎﻟﻌﺎت 2003) Usama Beshay) ﻣﺒﻨﯽ ﺑـﺮ آراﯾـﺶ اﺗﻔﺎﻗﯽ ﺳﻠﻮﻟﻬﺎي ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﺎﯾﯽ ﻣﺤﺒﻮس ﺷﺪه در آﻟﮋﯾﻨﺎت ﻫﻤﺎﻫﻨﮕﯽ دارد (ﺷﮑﻞ .)3در اﯾﻦ ﺗﺤﻘﯿﻖ ﺗﺎﺛﯿﺮ ﮔﻮﯾﭽﻪ ﻫﺎي ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﺎﯾﯽ در ﯾﮏ ﭘﺴﺎب آﻟﻮده ﮐﺎﻫﺶ ﻗﺎﺑﻞ ﻣﻼﺣﻈﻪ اي از ﻣﺠﻤﻮﻋﻪ ﺳﻪ ﻓﻠـﺰ Ni ، V وCd را ﻧﺸﺎن داد ﮐﻪ ﻣﯽ ﺗﻮاﻧﺪ دﯾﺪﮔﺎﻫﯽ ﻣﺜﺒﺖ در ﺟﻬﺖ اﺳﺘﻔﺎده از ﻣﯿﮑﺮوارﮔﺎﻧﯿﺴﻤﻬﺎ ﺑـﺮاي ﺑﺮداﺷـﺖ ﻣـﻮﺛﺮ و ﺑﺎزﯾﺎﻓـﺖ ﻓﻠﺰات ﺳﻨﮕﯿﻦ در ﭘﺴﺎب ﻫﺎي آﻟﻮده ﺑﻪ ﻋﻨﻮان ﯾﮏ روش ﺑﺎ ﺗﻮاﻧﺎﯾﯽ ﻣﺘﻔﺎوت در ﺗﮑﻨﯿﮏ ﻫﺎي ﺗﺠﺎري ﭘﺪﯾﺪآورد.             ÖReferencesBeshay, U. 2003. Production of alkaline protease by Teredinobacter turnirae cells immobilized in ca-alginate beads. African Journal of Biotechnology. 2: 60-65.Cabrera, G., J.M.Gomez, and D.Cantero. 2005. Kinetic study of ferrous sulphate oxidation of Acidi thiobacillus ferrooxidans in the presence of heavy metal ions. Enzyme and Microbial Technology. 36: 301-306.Chen, W., A.Mulchandani, and M.Deshusses. 2005. Environmental Biotechnology: Challenges and opportunities for chemical engineers. AICHE Journal. 51: 690-695.Hong, CH, and P.Shan-shan. 2005. Bioremediation potential of spirulina: toxicity and biosorption studies of lead. Journal of Zhejiang University Science. 6: 171-179. Hussein, H., S.Farag., K.Kandil, and H.Moawad. 2004. Tolerance and uptake of heavy metals by Pseudomonads. Process Biochemistry. 40: 955-961. Hussein, H., S.Farag., K.Kandeel, and H.Moawad. 2005. Biosorption of heavy metals from waste water using Pseudomonas sp. Electronic Journal of Biotechnology. http://www.ejbbiotechnology.info/content/vol7/Issue 1/Full/2/index.html. Lopez - Jimenez, G, and S.leborgne. 2003. Biofilms and adhesion protein in anaerobe bacteria isolated from Mexican gas pipelines. Proceeding of The 8th International Petroleum Environmental Conference,Abu Dhabi.Lyer, A., K.Mody, and J.Bhavanath. 2004. Biosorption of heavy metals by a marine bacterium. Marine Pollution Bulletin. 50: 340-343.Lyer, A., K.Mody, and J.Bhavanath. 2004. Accumulation of hexavalent chromium by an exopolysaccharide producing marine Enterobacter cloaceae. Marine Pollution Bulletin. 49: 974-977.Macaskie L.E, Dean A.C.R . 1984. Cadmium accumulation by a Citrobacter sp.j. Gem Microbial. 130: 53-62.Malekzadeh, F., A.Farazmand., H.Ghafourtian., M.Shahamat., M.Levin., R.R.Colwell, and R.R.Colwell. 2002. Uranium accumulation by a bacterium isolated from electroplating effluent. World Journal of Microbiology and Biotechnology. 18: 295-302Malone C.R. 1989. The Yucca Mountain Project storage problems of high-level radioactive waste. Environ. Scl. Technol. 23: 1452.Marques A.M, Roca X, Simon-pujol M.D, Fuste M.C, Congregado F. 1991. Uranium accumulation by pseudomonas sp. EPS 5028. Appi. Microbial. Biotechnol. 35: 406-410. Matagi, S.V., D.Swai, and R.Mugabe. 1998. A review of heavy metal removal mechanisms in wetlands. Afr. J. Trop. Hydrobiol. Fish. 8: 23-35. Paul, D., G.Pandey., J.Pandey, and K.Rakesh. 2005. Accessing microbial diversity for bioremediation and environmental restoration. TRENDS in Biotechnology. 23: 135-142.Piotrowska-seget, Z., M.Cycon, and J.Kozdroj. 2005. Metal -tolerant bacteria occurring in heavily polluted soil and mine spoil. Applied soil ecology. 28: 237-246. Pongratz, R, and G.Klaus. 1999. Production of methylated mercury, lead, and cadmium by marine bacteria as a significant natural source for atmospheric heavy metals in polar regions. Chemosphere. 39: 89-102.Wang, N. 2004. Cell immobilization with calcium alginate. http://www.glue.umd.edu/nsw/ench 485/lab7b.htm.Î Í Wong P.K, Lam K.C., C.M.So. 1993. Removal and recovery of Cu (II) from industrial effluent by immobilization cells of Pseudomonas putida II-11. Appl. Microbial. Biotechnol.39: 127-131.Zhaohui, XU., B.Weon., A.Mulchandani., K.Rajesh, and W.Chen. 2002. Heavy metal removal by novel CBD-EC20 sorbents immobilized on cellulose. Biomacromolecules. 3: 462-465.Î ÎDetermination & isolation of bacteria with capacity of Cd, Ni and V heavy metals decrease from Anzali Wetland in order to do bioremediationBy: Dr. Anita Khanafari, Dr. Ravanbakhsh Shirdam, Azam TabatabaeeAbstract:Biotechnology (microbe-based) has extended application to clean-up of pollutants in the environment. Microorganisms, collectively, are highly diverse in metabolism, so that (theoretically) any of a wide range pollutants can be degraded, decreased and uptaken given a suitable choice of microorganisms. In this research, we used of BHI agar with concentration of 20-100 mg/l heavy metals such as Cadmium, Nickel and Vanadium, in order to do isolation of marine bacteria from the east Anzali marsh's sediments of Caspian Sea. Resistant colonies isolated and purified after culturing sediment's samples on BHI agar include metals and incubated at 30C for 72 h. After determination of MIC and MBC ratio, the most resistant bacteria were obtained. Heavy metals uptake was determined by flow injection analysis in both biomass as well as the supernatant. The results confirmed that an increase of absorption and growth in cell bacteria in the presence of Cadmium and Nickel at 80-100 mg/l and Vanadium at 40 mg/l concentrations. The maximum absorption obtained, at 30C in 72 h.These results suggested that %40-50 bioaccumulation for Cadmium, %5-6 for Nickel and %10-12 for Vanadium by these free bacteria. In the second stage the cells of marine bacteria were immobilized in sodium alginate gel and the results showed that, these bacteria had more efficiency in biosorbing heavy metals than free cells (50-100%). Then, immobilized bacteria cells were prepared in alginate beads after being fixed in %2 glutaraldehide for morphology studies with Scanning Electron Microscopy. The Scanning Electron Microscopy analysis indicates that the marine bacteria were capable of accumulating several metals. Keyword: Bioremediation, marine bacteria, Cadmium, Vanadium, NickelÎ Ï010203040506070 اول دوم ﺳﻮم ﭼﮭﺎرم ﭘﻨﺠﻢ ﺷﺸﻢ ھﻔﺘﻢ ھﺸﺘﻢ ﻧﮭﻢ دھﻢ ﯾﺎزدھﻢ دوازدھﻢ ﺳﯿﺰدھﻢ ﭼﮭﺎردھﻢزﻣﺎن (روز)ﻣﯿﺰان ﺟﺬب ﻓﻠﺰ (ppm)ASW1ASW1-1ASW2-1ASW3ASW3-1 ASW4-100-Cd ASW4/1-100-CdASW4-100-NiASW4/1-100-Ni ASW4-100-V ASW4/1-100-V ﺷﮑﻞ - 1 ﻣﻘﺎﯾﺴﻪ ﺳﻮﯾﻪ ﻫﺎي ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﺎﯾﯽ از ﻧﻈﺮ ﺟﺬب ﻓﻠﺰ و اﻧﺘﺨﺎب ﺑﻬﺘﺮﯾﻦ ﺳﻮﯾﻪ ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﺎﯾﯽ ﺟﺪول - 1 وﺿﻌﯿﺖ ﺑﺎﮐﺘﺮي ﻫﺎي ﺗﺨﻠﯿﺺ ﺷﺪه از رﺳﻮﺑﺎت ﺗﺎﻻب اﻧﺰﻟﯽ در ﺑﺮاﺑﺮ ﻏﻠﻈﺖ ﻫﺎي ﻣﺨﺘﻠﻒ ﻓﻠﺰاتMBCﺑﻌﺪ از48 ﺳﺎﻋﺖMICﺑﻌﺪ از48 ﺳﺎﻋﺖﮐﺸﺖ در ﻣﺤﯿﻂ BHI broth ﺣﺎوي ﻏﻠﻈﺖ ﻫﺎي ﻣﺨﺘﻠﻒ ﻓﻠﺰات (ppm) ( دردﻣﺎي 30c ﺑﺮاي 72 ﺳﺎﻋﺖ) ﮐﻠﻨﯽ ﻫﺎي اﯾﺰوﻟﻪ ﺷﺪه از  رﺳﻮﺑﺎت 5 10 15 20 40 60 80 100 100ppm 120 ppmﺑﻌﺪ از 5 روز رﺷﺪ  زﯾﺎد AWS1       - 80ppm 100 ppmﺑﻌﺪ از 5 روز ﮐﻤﯽ رﺳﻮب AWS1-1      - 100 و 80 ppm 120 ppmﺑﻌﺪ از 10 روز رﺳﻮب داده AWS2-1      AWS3      - - - 60ppm 80ppmAWS3-1    - - - - - 20ppm 40ppmAWS4         120ppm 140ppmAWS4-1        - 100ppm 120ppm ﻗﺎﺑﻠﯿﺖ رﺷﺪ ﺑﺎﮐﺘﺮي در ﻣﺤﯿﻂ ﮐﺸﺖ ﺣﺎوي ﻓﻠﺰات Cd, Ni , V- ﻋﺪم رﺷﺪ ﺑﺎﮐﺘﺮي در ﻣﺤﯿﻂ ﮐﺸﺖ ﺣﺎوي ﻓﻠﺰات Cd, Ni , V  ﺟﺪول : 2 ﻧﺘﺎﯾﺞ ﺗﺸﺨﯿﺺ ﺳﻮﯾﻪ ﻫﺎي ﻣﻘﺎوم ﺑﻪ ﻓﻠﺰات  ﻧﺎم ﺳﻮﯾﻪ ﻣﺤﻞ ﺟﺪاﺳﺎزي ﺗﻌﯿﯿﻦ ﻫﻮﯾﺖ ﻧﻬﺎﯾﯽ PTCC 1664 Pseudomonas putida ﺑﺎﺳﯿﻞ ﮔﺮم ﻣﻨﻔﯽ AWS1 رﺳﻮب ﻗﺴﻤﺖ ﺷﺮﻗﯽ ﺗﺎﻻب اﻧﺰﻟﯽ (درﯾﺎي ﺧﺰر )1665 Bacillus cereus ﺑﺎﺳﯿﻞ ﮔﺮم ﻣﺜﺒﺖ AWS3 رﺳﻮب ﻗﺴﻤﺖ ﺷﺮﻗﯽ ﺗﺎﻻب اﻧﺰﻟﯽ (درﯾﺎي ﺧﺰر )1666 Pseudomonas pseudoalkaligenes ﮐﻮﮐﻮ ﺑﺎﺳﯿﻞ ﮔﺮم ﻣﻨﻔﯽ AWS4 رﺳﻮب ﻗﺴﻤﺖ ﺷﺮﻗﯽ ﺗﺎﻻب اﻧﺰﻟﯽ (درﯾﺎي ﺧﺰر )ΠРروز دوم 020406080100120ASW1ASW1ASW3ASW4-100-CdASW4-100-NiASW4-100-Vﺳﻮﯾﮫ ھﺎي ﺑﺎﻛﺘﺮﯾﺎﯾﻲﻣﯿﺰان ﺟﺬب ﻓﻠﺰ (ppm)ﺳﻠﻮﻟﮭﺎي آزاد روز 2ﮔﻮﯾﭽﮫ ھﺎي ﺑﺎﻛﺘﺮﯾﺎﯾﻲ روز 2 روز ﭘﻨﺠﻢ020406080100120ASW1ASW1ASW3ASW4-100-CdASW4-100-NiASW4-100-Vﺳﻮﯾﮫ ھﺎي ﺑﺎﻛﺘﺮﯾﺎﯾﻲﻣﯿﺰان ﺟﺬب ﻓﻠﺰ (ppm)ﺳﻠﻮﻟﮭﺎي آزاد روز 5ﮔﻮﯾﭽﮫ ھﺎي ﺑﺎﻛﺘﺮﯾﺎﯾﻲ روز 5 روز ھﻔﺘﻢ020406080100120ASW1ASW1ASW3ASW4-100-CdASW4-100-NiASW4-100-Vﺳﻮﯾﮫ ھﺎي ﺑﺎﻛﺘﺮﯾﺎﯾﻲﻣﯿﺰان ﺟﺬب ﻓﻠﺰ (ppm)ﺳﻠﻮﻟﮭﺎي آزاد روز 7ﮔﻮﯾﭽﮫ ھﺎي ﺑﺎﻛﺘﺮﯾﺎﯾﻲ روز 7 روز ﻧﮭﻢ020406080100120ASW1ASW1ASW3ASW4-100-CdASW4-100-NiASW4-100-Vﺳﻮﯾﮫ ھﺎي ﺑﺎﻛﺘﺮﯾѧﺎﯾﻲ ﻣﯿﺰان ﺟﺬب ﻓﻠﺰ (ppm)ﺳﻠﻮﻟﮭﺎي آزاد روز 9ﮔﻮﯾﭽﮫ ھﺎي ﺑﺎﻛﺘﺮﯾﺎﯾﻲ روز 9 روز دوازدھﻢ020406080100120ASW1ASW1ASW3ASW4-100-CdASW4-100-NiASW4-100-Vﺳﻮﯾﮫ ھﺎي ﺑﺎﻛﺘﺮﯾﺎﯾﻲﻣﯿﺰان ﺟﺬب ﻓﻠﺰ (ppm)ﺳﻠﻮﻟﮭﺎي آزاد روز 12ﮔﻮﯾﭽﮫ ھﺎي ﺑﺎﻛﺘﺮﯾﺎﯾﻲ روز 12روز ﭼﮭﺎردھﻢ0102030405060708090100ASW1ASW1ASW3ASW4-100-CdASW4-100-NiASW4-100-Vﺳﻮﯾﮫ ھﺎي ﺑﺎﻛﺘﺮﯾﺎﯾﻲﻣﯿﺰان ﺟﺬب ﻓﻠﺰ (ppm)ﺳﻠﻮﻟﮭﺎي آزاد روز 14ﮔﻮﯾﭽﮫ ھﺎي ﺑﺎﻛﺘﺮﯾﺎﯾﻲ روز 14ASW1: ﺳﻮﯾﻪ ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﺎﯾﯽ ﻣﻘﺎوم ﺑﻪ Cdو NiASW3: ﺳﻮﯾﻪ ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﺎﯾﯽ ﻣﻘﺎوم ﺑﻪ VASW4: ﺳﻮﯾﻪ ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﺎﯾﯽ ﻣﻘﺎوم ﺑﻪ ﻫﺮ ﺳﻪ ﻓﻠﺰ Cd, Ni, V ﺷﮑﻞ : 2 ﻣﻘﺎﯾﺴﻪ ﻣﯿﺰان ﺟﺬب ﻓﻠﺰات ﺗﻮﺳﻂ ﺳﻠﻮل ﻫﺎي آزاد ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﺎﯾﯽ و ﮔﻮﯾﭽﻪ ﻫﺎي ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﺎﯾﯽ ( 2 14- روز )Î Ñ  ﺷﮑﻞ - 3 ﻧﻤﺎي ﻣﯿﮑﺮوﺳﮑﻮپ اﻟﮑﺘﺮوﻧﯽ از ﺳﻮﯾﻪ ﻫﺎي ﺑﺎﮐﺘﺮﯾﺎﯾﯽ ﻣﺤﺒﻮس ﺷﺪه در آﻟﮋﯾﻨﺎت ﺳﺪﯾﻢ